«PETTREE» - женский журнал

Чувствительность энзимного исследования определяется активностью фермента в печени, его расположением в клетке, быстротой распада и выведения из сыворотки и др. Клиническая ценность отдельных энзимных исследований при печеночной патологии зависит от их специфичности — чувствительности. Сочетание нескольких энзимных исследований значительно повышает возможность доказательства печеночных повреждений и уточнения их стадии и патогенеза. В печеночной диагностике особенно ценным является исследование энзимного спектра в сыворотке, включающего ГОТ, ГПТ, орнитинкарбамилтрансферазу, глютамат-дегидрогеназу, щелочную фосфатазу и холинэстеразу. Одновременное определение активности энзимов в сыворотке и в гомогенатах печеночной ткани (полученной путем пукционной биопсии) позволяет более углубленно изучить патогенез энзимных нарушений. Исследования Schmidt и соавт., Schmidt и Schmidt и Мансуровой показали, что соотношения между энзимной активностью в печени и сыворотке достаточно сложны; для отдельных ферментов отклонения этих показателей противоположны. Щелочная фосфатаза и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа увеличивают свою активность в сыворотке и в печеночной ткани, холинэстераза понижается в сыворотке и увеличивается в печени, трансаминазы и ряд других энзимов увеличиваются в сыворотке и понижаются в печени. Механизм этих изменений выяснен не полностью, и классическая теория о гиперэнзимемии не может ответить на все вопросы. Известную роль играют расположение фермента в органеллах печеночных клеток и клеток желчных каналов, а также факторы, вызывающие «деформацию» энзимной активности в сыворотке, и др.

Гиперэнзимемии встречаются намного чаще при печеночной патологии. В редких случаях она может быть связана с усиленным биосинтезом энзима в печени вследствие субстратной индукции при одностороннем питании. Чаще гиперэнзимемия является результатом повреждения клеточных мембран или клеточного распада. Ее патогенетический механизм полностью не выяснен, но считается, что основную роль играет нарушенный энергетический баланс печеночных клеток. При более легких повреждениях, когда нарушена проницаемость клеточных мембран, обычно обнаруживается гиперэнзимемия цитоплазменных энзимов. При тяжелых повреждениях увеличиваются и митохондриально расположенные энзимы. Экскреционные энзимы повышаются в сыворотке при экстра — и интрапеченочном холестазе вследствие нарушенной элиминации желчи и рефлюкса. По-видимому, известную роль играет и увеличенный их биосинтез. При клинической оценке результатов исследования активности энзимов в сыворотке следует иметь в виду влияние ряда факторов, вызывающих так называемую деформацию энзимного спектра в сыворотке по сравнению с таковым в печеночной клетке. Все эти факторы определяют два основных качества энзимных исследований — специфичность и чувствительность. Специфичность органоспецифических печеночных энзимов всегда относительна, так как они содержатся и в других органах. Их относительная специфичность обусловливается высокой их активностью в печени по сравнению с другими органами.

Из многочисленных метаболических цепей, расположенных в митохондриях (окислительное фосфорилирование, (3-окисление жирных кислот и др.), клиническое значение имеют прежде всего глютаматдегидрогеназа и алкоголь-дегидрогеназа. Смешанное расположение (цитоплазменно и мито-хондриально) имеют ГОТ, малатдегидрогеназа, гексокиназа и др. В эндоплазматическом ретикулуме расположены 6-глюкуронидаза, глюкуронилтрансфераза и глюкозо-6-фосфатаза. В лизосомах содержатся кислая фосфатаза, пептидаза, рибонуклеаза и другие гидролитически действующие ферменты. Изменения активности энзимов в печеночной ткани отражаются на ферментной активности в сыворотке, которая легко может быть исследована и может служить в качестве индикатора состояния гепатоцита. При печеночных заболеваниях в сыворотке чаще всего находят гипер — или гипоэнзимемию. Гипоэнзимемия наблюдается в основном относительно секреционных энзимов. Когда причиной является генетически обусловленная недостаточность биосинтеза фермента в печени, в сыворотке обнаруживается полное его отсутствие и эти заболевания относятся к дефект диспротеинемиям (гепатолентикулярная дегенерация, афиб-риногенемия и др.). Сюда относятся и случаи с наследственной атипической псевдохолинэстеразой, а также и так называемая наследственная непереносимость фруктозы, при которой в печени и сыворотке определяется полное отсутствие фруктозо-1-фосфатальдолазы. Снижение секреционных энзимов в сыворотке при острых и хронических печеночных заболеваниях следует интерпретировать как результат сниженного биосинтеза. В редких случаях это может быть связано с ингибированием, разрушением или усиленным элиминированием фермента.

Растворимая часть очень богата различными энзимами, принимающими участие в отдельных процессах. Она содержит особенно много ферментов: альдолазу, аконитатгидратазу, фосфоглюкомутазу, гексозодифосфатазу, лейцинаминопептидазу, ксантиноксидазу и др.. Для иллюстрации энзимов, содержащихся в органеллах гепатоцитов, проводится следующая таблица (по Dixon и Webb). Наиболее богаты энзимами митохондрии гепатоцита. Они являются «силовой станцией» клетки. Митохондрии содержат от 50 до 65 печеночных коэнзимов, флавинадениндинуклео-тид, цитохром С, цитохром А, В и др. В плавающей растворимой части клетки (супернатанте), образующейся после центрифугирования печеночного гомогената, находится также множество энзимов. Некоторые ферменты типа малат-дегидрогеназы, аргиназы, аденозин-3-фосфатазы, аденозиндифосфа-тазы, 5-нуклеотидазы и др., содержатся как в ядре, так и в митохондриях, микросомах и растворимой части. Печень очень богата белками и 70-80% из них являются энзимами и подвержены непрерывному распаду и биосинтезу. Они полностью обновляются приблизительно за 20 дней. Гепатоциты непрерывно усиливают или ослабляют свой обмен путем внутриклеточного увеличения энзимной активности. Это осуществляется посредством постоянной субстратной или гормональной индукции. Внутриклеточное расположение энзимов в гепатоците связано с локализацией цепей обмена веществ, в которых они участвуют. Большая их часть расположена в цитоплазме — энзимы гликолиза и обмена аминокислот (лактатдегидрогеназа, фруктозо-1,6-дифосфа-тальдолаза, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа, 6-фосфоглюконатдеги-дрогеназа, ГПТ), энзимы обмена фруктозы (фруктозо-1-фосфаталь-долаза, сорбитолдегидрогеназа), энзимы цикла мочевины (орнитин-карбамилтрансфераза, аргиназа) и др.

Микросомы представляют собой небольшие образования, распыленные по всему гепатоциту. Они содержат каталазу, уратоксидазу, а-аминокислую оксидазу. Некоторые авторы считают их предшественниками митохондрий и в основном производителями энергии, необходимой для окислительных процессов и гликонеогенеза. Эндоплазматический ретикулум представляет собой систему из цилиндрических и пузырчатых образований, разбросанных по цитоплазме гепатоцита. Он бывает зернистым и гладким. Его называют еще эргастоплазмой. Зерна представляют собой рибосомы, которые открываются и свободно плавают в цитоплазме. Считается, что в рибосомах в основном происходит синтез белка для нужд как организма, так и самой клетки. Здесь синтезируются также гликопротеины, происходит и каталитический распад гликогена при участии энзима глюкозо-6-фосфатазы. Так называемая микросомная фракция, полученная при дифференциальном центрифугировании, состоит преимущественно из частиц эндоплазматического ретикулума. Микросомы содержат преимущественно эстеразы, а также арилсульфатазу С, глюкозо-6-фосфатазу, галоил СоА-синтетазу, цитохром С-редуктазу, цитохром В5-редуктазу и цитохром Р460. Основная субстанция гепатоцита или цитоплазма является фактически средой, в которой расположены клеточные органеллы. При воспалительных и дегенеративных процессах печени именно в этой основной субстанции клетки откладываются нейтральные жиры и образуются светлые пятна. В этой части клетки обнаруживаются и гликогеновые частицы. В цитоплазме определяются также частицы металлов, пигменты, вирусоподобные частицы и др.