«PETTREE» - женский журнал

Пробирки закрывают так же, как при определении устойчивости и выдерживают в термостате 10 дней, после чего из осадка приготовляют мазки. Высохшие мазки фиксируют над огнем и окрашивают по Цилю-Нильсену. Результаты оценивают по микроскопической картине роста по трехбалльной системе и сравнивают с ростом в контроле. Культура, выросшая на среде с разведениями плазмы больного, оценивается как растущая не только при наличии сплошного роста, но и при большом числе изолированных кос и жгутов почти в каждом поле зрения; при наличии в мазках единичных (не более 2-3). Положительная туберкулостатическая проба является благоприятным показателем соотношений концентрации активного ГИНК в крови, при лечении больного используемой тест-дозой препарата, и чувствительности к этой концентрации микобактерий туберкулеза. При отрицательной туберкулостатической пробе целесообразно (при условии переносимости) увеличить дозу препарата и провести повторное исследование. Можно определять бактериостатическую активность крови не только после приема тубазида, но и после приема других препаратов в различных их сочетаниях, получаемых больным. В этих случаях больной утром принимает все назначенные ему препараты (например, тубазид, стрептомицин и ПАСК либо комбинации с препаратами II ряда), далее по описанной методике определяют чувствительность или устойчивость микобактерий туберкулеза, выделенных от больного, к той бактериостатической концентрации, которая создается в крови больного после приема комплекса антибактериальных препаратов (Н. Ф. Бибик, 1968, 1969; Н. Я. Батманов и С. С. Каневская, 1969; Т. С. Гинзбург, 1969; Т. С. Гинзбург и Т. Н. Яшенко, 1970; Е. И. Жогло, 1970; И. Е. Гурьян, А. С. Свитнева, Е. Ф. Тарасова, 1971). Применение в практике туберкулостатической пробы дает большее представление об эффективности того или иного препарата или их комбинаций, чем только определение концентрации препарата в крови или только лекарственной чувствительности выделенной от больного культуры микобактерий туберкулеза.

Фотохромогенные микобактерии устойчивы к препаратам I ряда, но чувствительны к циклосерину, канамицину, виомицину, рифампицину, этамбутолу, тибону. Скотохромогенные — устойчивы к препаратам I ряда, но некоторые сохраняют к ним чувствительность. Они чувствительны к циклосерину, канамицину, виомицину, этамбутолу. Атипичные микобактерии непигментные и скорорастущие устойчивы к препаратам I и II ряда: некоторые из них чувствительны к циклосерину и этамбутолу. Из числа атипичных М. xenopei (3 группа) чувствительны к препаратам I и II ряда. Все атипичные культуры II, III и IV групп устойчивы к тибону. Если атипичная культура выделена от больного туберкулезом, лечившегося этими препаратами, то признак их лекарственной устойчивости не мджет явиться дифференциально-диагностическим критерием (Н. М. Макаревич, Н. М. Рудой, 1971). Каталазная активность определяется по принятой методике. В практике для ориентировочных целей широко используется качественное определение каталазы, при более глубоких исследованиях атипичных культур прибегают к количественному определению этого фермента. Если у больных, лечившихся антибактериальными препаратами, определяются типичные тубазидоустойчивые микобактерии туберкулеза, то они чаще каталазоотрицательны, атипичные же микобактерии при выраженной устойчивости к тубазиду оказываются каталазоположи-тельными. Кислотоустойчивые сапрофиты лекарственноустойчивы и высоко каталазоположительны. При количественном определении активной каталазы за 100о/0 принимают способность 15 мг культуры расщеплять в течение 15 минут 0,5 мл 0,5% раствора перекиси водорода. При этом имеются следующие показатели ее наличия:

Исследования на неспецифическую микрофлору проводят с помощью бактериоскопических и общепринятых бактериологических методов, поэтому мы не приводим подробное описание всех возможных исследований, а отметим только некоторые особенности и дадим рекомендации для выполнения тех или иных анализов в клинике туберкулеза. На неспецифическую микрофлору исследуют различный патологический материал, который собирают в стерильную посуду и доставляют в лабораторию в свежем виде. Для успешного выполнения анализа необходимо соблюдать определенные правила сбора материала. Мокроту собирают (2-3 плевка) утром натощак после тщательного полоскания рта свежей кипяченой водой. Материал из зева и носа берут стерильными ватными тампонами; в момент взятия корень языка придавливают шпателем, во избежание загрязнения материала флорой ротовой полости. Материал из свищей и операционных ран берут также ватным тампоном. Пузырную мочу у женщин берут утром катетером, у мужчин при мочеиспускании собирают среднюю часть утренней ее порции. Почечную мочу получают путем катетеризации мочеточников. Операционный материал — кусочки резецированной ткани: стенка и содержимое каверны, очаги поражения легких или почек, а также другой патологический материал помещают (в операционной) в стерильную посуду (чашку Петри или пробирку) и немедленно доставляют в лабораторию, где с максимальным соблюдением асептики кусочки ткани разрезают стерильными ножницами и из глубины разреза бактериологической петлей берут материал для посева. Изучая неспецифическую микрофлору, производят бактериоскопические (окраски мазков по Граму) и бактериологические исследования (выделение чистых культур, их идентификация и определение лекарственной чувствительности).

При туберкулезе других локализаций любой патологический материал (экссудат, гной, моча, спинномозговая жидкость, кусочки ткани и т. д.) исследуют на наличие микобактерий туберкулеза как бактериоскопически, так и бактериологически. Зная число больных активным легочным туберкулезом, у которых необходимо решать вопрос о бацилловыделении или абациллярности, и делая расчет исходя в среднем из трех-четырех посевов в год на больного, можно рассчитать нагрузку лабораторий. Противотуберкулезных лечебных учреждениях) в отношении производства посевов. Посев на туберкулез по затрачиваемому времени расценивается в 5 лабораторных единиц (1 единица = 10 минутам), т. е. один посев требует 50 минут рабочего времени вместе врача и лаборанта, причем в эти 50 минут выполняются все процедуры: от приготовления стерильной посуды, растворов, регистрации и т. д. до выписки ответа включительно. Зная количество больных активным легочным туберкулезом, у которых надо определять бацилловыделение или абациллярность, определив количество необходимых посевов и учтя время, затрачиваемое на один посев (50 минут), можно рассчитать и количество лабораторных работников, могущих выполнить эту работу. Дополнительно предусматривается время для определения лекарственной устойчивости всех выделенных культур микобактерий туберкулеза. Определение устойчивости микобактерий туберкулеза на плотных средах к трем препаратам примерно в 1/2 раза (с включением всех процедур) превышает время, затрачиваемое на выполнение одного посева. Расчет ведется к числу выделенных культур. Определение устойчивости к препаратам второго ряда увеличивает затрату времени примерно на 0,5 от определения к трем препаратам первого ряда. Также дополнительно предусматривается время для определения неспецифической микрофлоры, а у заведующего центральной бактериологической лабораторией — на организационно-методическую и педагогическую работу. При расчете штатов бактериологических лабораторий целесообразным является на одного врача-лаборанта иметь трех-четырех лаборантов со средним образованием.

Однако в лабораторной практике к палочкоядерным нейтрофилам часто относят лишь такие клетки, ядро которых не имеет перехватов и расположено в одной плоскости. Подобная трактовка ведет при подсчете к уменьшению числа этого вида клеток. При наличии сдвигов в гемограмме следует подсчитывать 20&„лейкоцитов в двух мазках с выведением средних цифр. Ядерный сдвиг нейтрофилов может быть определен более тонко при подсчете по способу Арнета. Изучая ядерные сдвиги при различных инфекциях и в том числе при туберкулезе, Arneth (1920) отметил, что параллельно с тяжестью инфекции возрастает число малосегментированных и несегментированных форм (сдвиг влево). Способ Арнета позволяет в ряде случаев установить наличие левого сдвига с нарастанием числа двусегментированных нейтрофилов при отсутствии увеличения палочкоядерных форм. О. В. Глебович (1957) обнаружил в период интоксикации левый сдвиг при обычном подсчете гемограммы (по Шиллингу) лишь у 57,6% больных туберкулезом, в то время как по Арнету он выявился у 90,4%. При исследовании гемограммы у больных туберкулезом может представить интерес определение патологической зернистости нейтрофилов, которая появляется при обострении процесса позднее, чем палочкоядерный сдвиг, нарастает при его снижении, а затем медленно снижается и может длительно оставаться повышенной при нормализации других показателей гемограммы, свидетельствуя о неполном восстановлении функции организма. Патологическая зернистость, выявленная Mommsen (1929) при рН 5,4, была исследована в клинике туберкулеза И. А. Шмелевым (1935), который несколько видоизменил метод окраски по Моммзену. Повышение числа нейтрофилов с патологической зернистостью в гемограмме больного туберкулезом (норма до 2-6%) указывает на то, что обострение имеет известную давность и уже сказалось нарушением процесса формирования нейтрофилов.